Abstract The present study aimed to evaluate, in vitro, the cestocidal effect of Pyrantel-Oxantel on the Dipylidium caninum tapeworm. Each intestine sample was obtained by means of a transversal incision of the abdominal area of each euthanized canine subject, individually dissected via longitudinal incision, and examined for the presence of D. caninum. An optical microscope was used to identify and verify proglottid morphology and viability based on its macroscopic appearance. The cestocidal effects of Pyrantel-Oxantel (75 mg pyrantel pamoate; 75 mg oxantel pamoate) were assessed in adult tapeworms (treated group, n= 21; control group, n= 21) placed on Petri dishes and incubated at 37 °C. One-hour post-incubation, the D. caninum cestodes treated with Pyrantel-Oxantel presented a 28 % decrease (P=0.001) in motility, which rose to a 52 % (P=0.0001) decrease by the end of the second hour. The control group (P=0.0001) presented 55.7 % motility for at least the first six hours of incubation and 4.2 % (P=0.001) motility by the end of the study, while 0 % motility was observed in the treated group by the end of the study. Pyrantel-Oxantel had a lethal effect (P=0.0001) on adult D. caninum, with 100 % mortality observed 6 h after in vitro post-incubation, while the control group presented 55.7 % viability after the same time period. In addition, Pyrantel-Oxantel reduced (P=0.001) tegument thickness by 42.5 % (10.24 ± 0.21 µm), while this was 17.81 ± 0.33 µm for the control group. The results of this study indicate that Pyrantel-Oxantel has a therapeutic effect on the presence of D. caninum, inducing both a reduction of the tegument thickness and increased mortality.

Resumen El presente estudio tuvo como objetivo evaluar, in vitro, el efecto cestocida de Pirantel-Oxantel en la tenia Dipylidium caninum. Cada muestra de intestino se obtuvo mediante una incisión transversal de la zona abdominal de cada sujeto canino sacrificado, se diseccionó individualmente a través de una incisión longitudinal y se examinó para detectar la presencia de D. caninum. Se utilizó un microscopio óptico para identificar y verificar la morfología y viabilidad de la proglótide en función de su aspecto macroscópico. Los efectos cestocidas de Pirantel-Oxantel (75 mg de pamoato de pirantel; 75 mg de pamoato de oxantel) se evaluaron en tenias adultas (grupo tratado, n= 21; grupo testigo, n= 21) colocadas en placas de Petri e incubadas a 37 °C. Una hora postincubación, los cestodos D. caninum tratados con Pirantel-Oxantel presentaron una disminución del 28 % (P= 0.001) en la motilidad, la cual aumentó a una disminución del 52 % (P=0.0001) al final de la segunda hora. El grupo testigo (P= 0.0001) presentó un 55.7 % de motilidad durante al menos las primeras 6 h de incubación y 4.2 % (P= 0.001) de motilidad al final del estudio, mientras que en el grupo tratado se observó un 0 % de motilidad al final del estudio. El Pirantel-Oxantel tuvo un efecto letal (P= 0.0001) en el adulto de D. caninum, con una mortalidad del 100 % observada 6 h después de la postincubación in vitro, mientras que el grupo de control presentó un 55.7 % de viabilidad después del mismo periodo. Además, el Pirantel-Oxantel redujo (P= 0.001) el grosor del tegumento en 42.5 % (10.24 ± 0.21 μm), mientras que éste fue de 17.81 ± 0.33 μm para el grupo testigo. Los resultados de este estudio indican que el Pirantel-Oxantel tiene un efecto terapéutico en la presencia de D. caninum, induciendo tanto una disminución del grosor del tegumento como un aumento de la mortalidad.

SUMMARY: The purpose of this study was to evaluate by morphological methods, if a mixture of Fibroquel® and hyaluronic acid implanted in an animal model of cranial bone injury could promote bone regeneration. 12 Wistar rats were divided in three groups, control group, bone injury without treatment and bone injury with treatment. After experimental period, bone samples were taken and stained with H & E, Masson trichrome, PAS-D, immunohistochemistry with anti-PCNA monoclonal antibody and applied a semiquantitative morphometric method. Treatment group showed extensive areas of collagen fibers in contact with normal bone tissue, areas of normal histology, PAS positive material and less cellular proliferation. We demonstrated for the first time that a mixture of Fibroquel® and hyaluronic acid implanted in an animal model of cranial bone injury promotes bone regeneration.

RESUMEN: El propósito de este estudio fue evaluar por métodos morfológicos, si una mezcla de Fibroquel® y ácido hialurónico implantado en un modelo animal de lesión del hueso craneal podría promover la regeneración ósea. Se dividieron 12 ratas Wistar en tres grupos, grupo control, lesión ósea sin tratamiento y lesión ósea con tratamiento. Después del período experimental, se tomaron muestras de hueso y se tiñeron con H & E, tricrómico de Masson, PAS-D, inmunohistoquímica con anticuerpo monoclonal anti-PCNA y se aplicó un método morfométrico semicuantitativo. El grupo de tratamiento mostró áreas extensas de fibras de colágeno en contacto con tejido óseo normal, áreas de histología normal, material PAS positivo y menor proliferación celular. Demostramos por primera vez que una mezcla de Fibroquel® y ácido hialurónico implantado en un modelo animal de lesión del hueso craneal promueve la regeneración ósea.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade predatória do nematoide Butlerius spp. e isolados fúngicos de Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis e Trichoderma esau contra larvas infectantes (L3) de Haemonchus contortus em vasos plantados com Panicum spp. Foram utilizados quarenta e oito potes plásticos de jardinagem contendo 140 g de solo estéril, 200 mg de sementes de Panicum spp.. Cultivar colonião, foi semeado em cada vaso e, diariamente, molhados com 10 mL de água da torneira. Doze dias após, os vasos foram divididos em 6 grupos (n = 8), e duas mil L3 de H. contortus foram adicionadas a cada vaso. Foram estabelecidos os seguintes tratamentos: Grupo 1 - 2.000 larvas de Butlerius spp.; Grupo 2 - A. musiformis (1x107 conídios); grupo 3 - T. esau (1x107 conídios); grupo 4 - C. rosea (1x107 conídios); grupo 5 - D. flagrans (1x107conidia); e Grupo 6 – somente L3 de H. contortus que serviu como controle negativo. A população de L3 de H. contortus expostas a Butlerius spp. foi reduzida em 61,9%. Redução populacional de 90,4, 66,7, 61,9 e 85,7% foram observadas nos vasos contendo A. musiformis, T. esau, C. rosea e D. flagrans, respectivamente. Os resultados deste estudo indicaram que o nematoide Butlerius spp. e os fungos avaliados exibiram importante atividade predatória e podem ser considerados como agentes de controle biológico.

Abstract The purpose of this study was to evaluate the predatory activity of the nematode Butlerius spp. and fungal isolates of Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis and Trichoderma esau against H. contortus infective larvae (L3) in grass pots. Forty-eight plastic gardening pots containing 140 g of sterile soil were used. Panicum spp. grass seeds (200 mg) were sown into each pot and individually watered with 10 mL of tap water. Twelve days after seeding, the pots were randomly divided into 6 groups (n=8). Two thousand H. contortus infective larvae (L3) were added to each group. Additionally, the following treatments were established: Group 1 – 2000 Butlerius spp. larvae; group 2 – A. musiformis (1x107 conidia); group 3 – T. esau (1x107 conidia); group 4 – C. rosea (1x107 conidia), group 5 – D. flagrans (1x107conidia) and Group 6 – no biological controller (control group). The larval population of H. contortus exposed to Butlerius spp. was reduced by 61.9%. Population reductions of 90.4, 66.7, 61.9 and 85.7% were recorded in the pots containing A. musiformis, T. esau, C. rosea and D. flagrans, respectively. The results of this study indicate that the predatory nematode Butlerius spp. and the assessed fungi display an important predatory activity can be considered suitable potential biological control agents.